摘要
采用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀、脂多糖诱导产生小鼠急性炎症三种炎症模型,以肿胀抑制率、肿胀度、细胞因子IL-17F、IL-1β、TNF-α、IL-6、SOD、MDA含量和脏器指数为指标,评估其抗炎活性。
复方香鱼口服液高、低剂量组均可明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀(P<0.01或P<0.05),抑制角叉菜胶所致的大鼠足肿胀(P<0.01或P<0.05),降低血清中MDA、IL-1β、IL-17F和肝组织匀浆中TNF-α、IL-6含量(P<0.01或P<0.05);同剂量组间比较,复方香鱼口服液对小鼠耳肿胀及大鼠足肿胀度的抑制作用优于单纯使用鱼腥草或三叶香茶菜(P<0.01或P<0.05)。
※ 基金项目 2020年度广西高校中青年教师科研基础能力提升项目(No.2020KY07033XP020039);广西一流学科建设开放课题(No.2019XK078);广西中医药大学2018年广西一流学科建设项目重点课题(No.2018XK038)
外感发热是指感受六淫之邪或温热疫毒之气,导致营卫失和,脏腑阴阳失调,出现病理性体温升高,伴面赤、恶寒、脉数等表现的一类病
复方香鱼口服液是根据桂派中医大师梁申教授的经验方复方香鱼合剂研制而成,此方由广西主产中草药三叶香茶菜和鱼腥草两味药组成,功效辛凉解表、清热解毒,临床上主要用于治疗外感发热风热犯肺证或热毒郁肺证,安全性较
SPF级昆明小鼠126只,雌雄各半,体质量18~22 g;SPF级SD大鼠90只,雌雄各半,体质量180~220 g;SPF级Babl/c小鼠72只,雌雄各半,体质量18~22 g。以上动物均由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(湘)2019-0004。
足趾容积测量仪(成都泰盟软件有限公司);电子调温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司);微孔板恒温孵育器(中国米欧);酶标仪(Thermo Scientific);离心机(Thermo Fisher);涡旋混合器(常州朗越仪器制造有限公司)。
将126只SPF级昆明小鼠适应性喂养5 d后,随机分为9组,每组14只。组别:空白对照组(蒸馏水);模型组(蒸馏水);阿司匹林阳性对照组(0.2 g·k
耳肿胀度=右耳片质量(mg)-左耳片质量(mg);耳肿胀抑制率(%)=(模型组肿胀度均值-给药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100%。
将90只SD大鼠适应性喂养5 d后,给每只大鼠右后足趾关节处画线作为标记,然后将其随机分为9组,每组10只。组别:空白对照组(蒸馏水);模型组(蒸馏水);阿司匹林阳性对照组(0.2 g·k
足跖肿胀度=致炎后足容积-致炎前足容积;足跖肿胀抑制率(%)=(模型组肿胀度均值-给药组肿胀度均值)/模型组肿胀度均值×100%;脏器指数=脏器质量(mg)/体质量(g)。
将72只SPF级Babl/c小鼠适应性喂养5 d,随机分为9组,每组8只,组别及给药同“2.1”。末次给药1 h后,除空白组外,其余各组小鼠均于腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)溶液(1 mg·m
与空白对照组比较,模型组小鼠耳肿胀度明显增加(P<0.01)。与模型组比较,阿司匹林阳性对照组、复方香鱼口服液高剂量组、复方香鱼口服液低剂量组、鱼腥草高剂量组及三叶香茶菜高、低剂量组小鼠耳肿胀度均降低,具有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。同等剂量组间比较,复方香鱼口服液高剂量组小鼠耳肿胀度低于鱼腥草高剂量组及三叶香茶菜高剂量组(P<0.01或P<0.05);复方香鱼口服液低剂量组耳肿胀度低于鱼腥草低剂量组及三叶香茶菜低剂量组(P<0.05)。这提示复方香鱼口服液对炎性肿胀具有明显的抑制作用,且其药效较其组成中的单味药强。见
组别 | 耳肿胀度(mg) | 耳肿胀抑制率(%) |
---|---|---|
空白对照组 | 0.01±0.82 | - |
模型组 |
11.54±3.5 | - |
阿司匹林阳性对照组 |
5.74±2.9 | 50.22 |
复方香鱼口服液低剂量组 |
7.01±4.2 | 39.26 |
复方香鱼口服液高剂量组 |
6.35±3.1 | 44.95 |
鱼腥草低剂量组 |
9.70±5.0 | 15.91 |
鱼腥草高剂量组 |
7.24±2.7 | 37.21 |
三叶香茶菜低剂量组 |
8.45±5.4 | 26.75 |
三叶香茶菜高剂量组 |
7.10±4.8 | 38.45 |
注: 与空白对照组比较
与空白对照组比较,模型组大鼠足肿胀度明显增加(P<0.01)。致炎后2~6 h,与模型组比较,阿司匹林阳性对照组、复方香鱼口服液高剂量组、复方香鱼口服液低剂量组、鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高剂量组的大鼠足肿胀度显著降低(P<0.01或P<0.05)。致炎后2~6 h,同等剂量组间比较,复方香鱼口服液高剂量组大鼠足肿胀度低于鱼腥草高剂量组及三叶香茶菜高剂量组(P<0.01或P<0.05);复方香鱼口服液低剂量组大鼠足肿胀度低于鱼腥草低剂量组及三叶香茶菜低剂量组(P<0.01)。这提示复方香鱼口服液有良好的抗炎作用,且持续时间较长,其抗炎作用较其组成中的单味药强。见
组别 | 致炎后2 h | 致炎后4 h | 致炎后6 h | |||
---|---|---|---|---|---|---|
肿胀度(mL) | 抑制率(%) | 肿胀度(mL) | 抑制率(%) | 肿胀度(mL) | 抑制率(%) | |
空白对照组 | 0.01±0.12 | - | 0.01±0.15 | - | 0.01±0.11 | - |
模型组 |
0.35±0.1 | - |
0.44±0.0 | - |
0.43±0.1 | - |
阿司匹林阳性对照组 |
0.15±0.0 | 57.95 |
0.19±0.0 | 57.44 |
0.28±0.1 | 35.65 |
复方香鱼口服液低剂量组 |
0.23±0.0 | 36.08 |
0.28±0.1 | 35.24 |
0.27±0.1 | 37.73 |
复方香鱼口服液高剂量组 |
0.22±0.1 | 36.36 |
0.22±0.1 | 48.97 |
0.24±0.1 | 45.14 |
鱼腥草低剂量组 |
0.32±0.1 | 10.51 |
0.33±0.1 | 24.49 |
0.33±0.1 | 23.15 |
鱼腥草高剂量组 |
0.23±0.1 | 33.52 |
0.26±0.1 | 40.50 |
0.31±0.1 | 27.78 |
三叶香茶菜低剂量组 |
0.33±0.1 | 6.25 |
0.32±0.1 | 26.54 |
0.36±0.1 | 17.36 |
三叶香茶菜高剂量组 |
0.24±0.0 | 32.67 |
0.31±0.1 | 28.15 |
0.32±0.1 | 27.08 |
注: 与空白对照组比较
各组大鼠脏器指数比较均无统计学差异(P>0.05),提示角叉菜胶所致炎症可能对大鼠脏器无影响。见
组别 | 肝指数 | 肾指数 | 脾指数 | 胸腺指数 |
---|---|---|---|---|
空白对照组 | 32.25±2.31 | 7.42±0.51 | 2.16±0.25 | 2.14±0.31 |
模型组 | 31.19±4.09 | 7.53±0.46 | 2.17±0.41 | 2.09±0.36 |
阿司匹林阳性对照组 | 33.97±2.38 | 8.56±0.76 | 2.08±0.26 | 1.56±0.39 |
复方香鱼口服液低剂量组 | 30.16±2.35 | 7.61±0.54 | 2.23±0.29 | 2.09±0.28 |
复方香鱼口服液高剂量组 | 32.54±3.59 | 7.41±0.39 | 2.37±0.42 | 2.05±0.29 |
鱼腥草低剂量组 | 31.02±4.20 | 7.24±0.45 | 2.20±0.29 | 2.26±0.35 |
鱼腥草高剂量组 | 33.01±4.02 | 7.41±0.52 | 2.17±0.26 | 2.21±0.25 |
三叶香茶菜低剂量组 | 31.77±2.06 | 7.48±0.54 | 2.20±0.32 | 2.22±0.56 |
三叶香茶菜高剂量组 | 32.65±2.89 | 7.62±0.60 | 2.21±0.28 | 2.24±0.30 |
与空白对照组比较,模型组大鼠血清中MDA、SOD含量明显增加(P<0.01)。与模型组比较,阿司匹林阳性对照组、复方香鱼口服液高剂量组、三叶香茶菜高剂量组大鼠血清中的MDA含量显著降低(P<0.01或P<0.05);复方香鱼口服液及其组成中的单味药各给药组大鼠血清中SOD酶含量均无统计学差异(P>0.05)。同等剂量组间比较,复方香鱼口服液高剂量组大鼠血清中的MDA含量低于鱼腥草高剂量组(P<0.01);复方香鱼口服液低剂量组大鼠血清中的MDA含量与鱼腥草低剂量组、三叶香茶菜低剂量组间无统计学差异(P>0.05)。这提示复方香鱼口服液抗炎作用可能与降低血清MDA含量有关。见
组别 | 血清MDA(nmol/mL) | 血清SOD(U/mL) |
---|---|---|
空白对照组 | 6.18±2.13 | 114.52±11.69 |
模型组 |
11.13±3.9 |
125.52±10.7 |
阿司匹林阳性对照组 |
6.07±1.8 | 115.33±13.55 |
复方香鱼口服液低剂量组 |
8.97±4.1 | 124.29±18.76 |
复方香鱼口服液高剂量组 |
7.59±1.4 | 132.71±14.72 |
鱼腥草低剂量组 |
8.97±3.4 | 136.86±15.16 |
鱼腥草高剂量组 |
9.42±2.8 | 128.71±13.15 |
三叶香茶菜低剂量组 |
8.41±2.7 | 138.71±21.48 |
三叶香茶菜高剂量组 |
7.92±3.2 | 137.29±10.50 |
注: 与空白对照组比较
造模后,模型组小鼠表现出精神状态萎靡,毛发竖立。阿司匹林阳性对照组的精神状态较模型组好,且大多数毛发未表现出竖立状态。其余各组同时还伴随腹泻。除空白组外,各组小鼠体温均明显较低。
与空白组比较,模型组小鼠血清中的IL-1β、IL-17F含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,阿司匹林阳性对照组、复方香鱼口服液高剂量组、复方香鱼口服液低剂量组、鱼腥草高剂量组及三叶香茶菜高、低剂量组的IL-1β含量均显著降低(P<0.01或P<0.05);阿司匹林阳性对照组、复方香鱼口服液高剂量组、三叶香茶菜高剂量组的IL-17F含量均显著降低(P<0.01或P<0.05),其余各组均无统计学差异(P>0.05)。同等剂量组间比较,复方香鱼口服液高剂量组小鼠血清中的IL-1β、IL-17F含量显著低于鱼腥草高剂量组(P<0.01),复方香鱼口服液高剂量组小鼠血清中的IL-1β含量显著低于三叶香茶菜高剂量组(P<0.01);复方香鱼口服液低剂量组小鼠血清中的IL-1β含量低于鱼腥草低剂量组(P<0.01),复方香鱼口服液低剂量组小鼠血清中的IL-17F含量低于鱼腥草低剂量组和三叶香茶菜低剂量组(P<0.01或P<0.05)。这提示复方香鱼口服液抗炎作用可能与降低血清IL-1β、IL-17F含量有关。见
组别 | 血清IL-1β | 血清IL-17F |
---|---|---|
空白对照组 | 24.50±4.25 | 55.53±16.53 |
模型组 |
37.09±6.3 |
118.74±23.3 |
阿司匹林阳性对照组 |
27.00±1.9 |
74.32±16.8 |
复方香鱼口服液低剂量组 |
31.57±5.3 |
120.55±22.3 |
复方香鱼口服液高剂量组 |
24.71±2.1 |
89.76±32.9 |
鱼腥草低剂量组 |
36.85±6.5 |
144.92±44.2 |
鱼腥草高剂量组 |
30.96±4.5 |
125.62±32.6 |
三叶香茶菜低剂量组 |
32.59±3.8 |
110.65±40.4 |
三叶香茶菜高剂量组 |
28.81±2.3 |
90.00±24.1 |
注: 与空白组比较
与空白组比较,LPS所致急性炎症小鼠肝脏中的TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,阿司匹林阳性对照组、复方香鱼口服液高剂量组、复方香鱼口服液低剂量组、鱼腥草高剂量组、鱼腥草低剂量组、三叶香茶菜高剂量组、三叶香茶菜低剂量组的TNF-α、IL-6含量均显著降低(P<0.01或P<0.05)。同等剂量组间比较,复方香鱼口服液高剂量组的IL-6含量低于鱼腥草高剂量组、三叶香茶菜高剂量组(P<0.05)。这提示复方香鱼口服液抗炎作用可能与降低肝组织匀浆TNF-α、IL-6含量有关。见
组别 | 肝组织TNF-α | 肝组织IL-6 |
---|---|---|
空白对照组 | 420.48±136.45 | 479.51±217.88 |
模型组 |
2549.59±773.9 |
1734.35±466.1 |
阿司匹林阳性对照组 |
811.26±562.8 |
499.85±269.3 |
复方香鱼口服液低剂量组 |
1087.80±462.0 |
719.34±295.2 |
复方香鱼口服液高剂量组 |
879.74±408.9 |
582.60±172.7 |
鱼腥草低剂量组 |
1069.44±240.0 |
782.35±306.8 |
鱼腥草高剂量组 |
807.47±364.2 |
675.14±228.0 |
三叶香茶菜低剂量组 |
848.68±415.7 |
645.71±157.6 |
三叶香茶菜高剂量组 |
807.85±328.0 |
646.26±318.1 |
注: 与空白组比较
与空白组比较,模型组小鼠脾指数显著增加(P<0.01)。与模型组比较,各给药组的脾指数无统计学差异(P>0.05)。这提示LPS可使小鼠脾指数增加,但复方香鱼口服液对LPS所致急性炎症小鼠脏器指数无影响。见
组别 | 脾指数 | 胸腺指数 |
---|---|---|
空白对照组 | 3.75±0.74 | 1.91±0.56 |
模型组 |
4.72±0.7 | 2.21±0.52 |
阿司匹林阳性对照组 | 4.78±0.85 | 1.53±0.65 |
复方香鱼口服液低剂量组 | 4.68±0.75 | 2.08±0.71 |
复方香鱼口服液高剂量组 | 4.53±0.58 | 1.75±0.45 |
鱼腥草低剂量组 | 4.60±0.87 | 1.97±0.66 |
鱼腥草高剂量组 | 4.33±0.68 | 2.23±0.75 |
三叶香茶菜低剂量组 | 4.31±0.50 | 2.19±0.74 |
三叶香茶菜高剂量组 | 5.06±0.82 | 1.55±0.48 |
注: 与空白组比较
复方香鱼口服液是由三叶香茶菜和鱼腥草组成。三叶香茶菜为唇形科植物牛尾草Isodon ternifolius(D.Don)Kudo的全
现代医学中的流行性感冒、急性肠胃炎、泌尿系统感染等疾病都可见外感发
本研究结果显示,复方香鱼口服液高、低剂量组均可明显抑制二甲苯引起的小鼠耳肿胀(P<0.01或P<0.05),抑制角叉菜胶所致大鼠足肿胀(P<0.01或P<0.05),显著降低血清中MDA、IL-1β、IL-17F和肝组织匀浆中TNF-α、IL-6含量(P<0.01或P<0.05);同剂量组间比较,复方香鱼口服液对小鼠耳肿胀及大鼠足肿胀度的抑制作用显著优于单纯使用鱼腥草或三叶香茶菜(P<0.01或P<0.05)。由此可看出,由鱼腥草、三叶香茶菜组成的复方香鱼口服液的抗炎作用强于其组成中的单味药,其作用机制可能与降低MDA、IL-17F、IL-1β、TNF-α、IL-6含量有关。
参考文献
朱丹,吕文良.外感发热的中医治疗[J].吉林中医药,2012,32(1):104-107. [百度学术]
朱立,齐文升.试论气虚发热与阳虚发热[J].中国中医急症,2018,27(3):484-487. [百度学术]
KLEIMAN A, TUCKERMANN J P.Glucocorticoid receptor action in benefuicial and side effects of steroid therapy:lessons from condutional knockout mice[J].Mol Cell Endocrinol, 2007, 275(1): 98-108. [百度学术]
李勇文.五味藤的抗炎免疫镇痛作用研究及机制初探[D].宁广西医科大学,2005:32. [百度学术]
黄珍定,梁庆嫦,梁申.复方香鱼合剂治疗外感发热660例体会[J].广西中医药,1984,7(6):9-10. [百度学术]
张志峰,吴尤娇,陈丽,等.藏药材白花刺参总皂苷的抗炎作用及机制[J].中药药理与临床,2018,34(5):47-50. [百度学术]
梁子宁,阎志刚,王勤,等.三叶香茶菜种子发芽特性研究[J].时珍国医国药,2009,20(7):1747-1749. [百度学术]
庾延和,魏江存,张昕,等.三叶香茶菜研究进展[J].亚太传统医药,2017,13(3):57-59. [百度学术]
张艳军.桂野桐和三叶香茶菜化学成分及其抗炎活性研究[D].桂林:广西师范大学,2019. [百度学术]
国家药典委员会.中国药典:一部[S].2020年版.北京:中国医药科技出版社,2020:234 [百度学术]
郭洪麟,徐涛,张乔.鱼腥草免疫作用及作用机制研究进展[J].黑龙江医药,2022,35(1):50-52. [百度学术]
丘宇慧,武曼丽,华荣.林夏泉辨治外感发热经验介绍[J].新中医,2022,54(13):200-204. [百度学术]
张静雯,庞燕,耿男,等.病毒性脓毒症的研究进展与启发[J].中国急救医学.2021,41 (3):270-274. [百度学术]
李香琴,朱俊宇,马娓,等.咪唑克生对内毒素攻击小鼠体内及体外活化巨噬细胞炎性介质释放的抗炎效应[J].中华危重病急救医学.2016,28 (5):445-449. [百度学术]
KIM J J, JO E K. NLRP3 inflammasome and host protection ag ainst bacterial infection[J]. JKorean Med Sci, 2013, 28(10): 1415-1423. [百度学术]
魏春华,程虹毓,高燕萍,等.藏药矮紫堇解热镇痛抗炎作用的研究[J].中国新药杂志,2017,26(3):337-342. [百度学术]
郭际.连翘挥发油抗炎作用及机理研究[D].成都:成都中医药大学,2005. [百度学术]
徐小惠,郑妮.虎杖苷通过TLR4/NF-κB信号通路调控糖尿病肾病大鼠肾脏炎症作用的研究[J].中国医院药学杂志,2018,38(16):1677-1680. [百度学术]
张国艳,张佳田,李癑,等.炎性细胞因子与糖尿病肾病[J].中国老年学杂志,2019,39(11):2819-2822. [百度学术]
CHEN J, XUAN J, GU Y T, et al. Celastrol reduces IL-1β induced matrix catabolism, oxidative stress and inflammation in human nucleus pulposus cells and attenuates rat intervertebral disc degeneration in vivo[J]. Biomed Pharmacother, 2017, 91: 208-219. [百度学术]
INOUE K, TAKANO H, YANAGISAWA R, et al. Antioxidative role of Interleukin-6 in Septic lung injury in mice[J]. Int J Immunopathol Pharmacol, 2008, 21(3): 501-507. [百度学术]
杨慧,任英,朱平,等.脂多糖活化的单核细胞对人Th17细胞分化的影响[J].细胞与分子免疫学杂志,2012,28(04):377-380. [百度学术]
TAKEUCHI O,AKIRA S. Pattern recognition receptors and inflammation[J]. Cell, 2010, 140(6): 805-820. [百度学术]
LIU Y, ZHAO Q, YIN Y,et al. Serum levels of IL-17 are elevated in patients with acute gouty arthritis[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2018, 497(3): 897-902. [百度学术]
KUWABARA T, ISHIKAWA F, KONDO M, et al. The role of IL-17 and related cytokines in inflam-matory autoimmune diseases[J]. Mediators Inflamm, 2017, 2017: 3908061. [百度学术]
YASUDA K, TAKEUCHI Y, HIROTA K. The pathogenicity of Th17 cells in autoimmune diseases[J]. Semin Immunopathol, 2019, 41(3): 283-297. [百度学术]
MCGEACHY M J, CUA D J, GAFFEN S L. The IL-17 family of cytokines in health and disease[J]. Immunity, 2019, 50(4): 892-906. [百度学术]