摘要
将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组、土藤草汤高剂量组、土藤草汤低剂量组，除正常对照组外，其他组用腺嘌呤和酵母建立高尿酸血症模型；正常对照组及模型组每日予蒸馏水10 mL·k
治疗前，与正常组比较，模型组及各治疗组尿酸水平明显升高（P<0.05），提示造模成功；与正常组比较，治疗3 w、4 w后模型组血尿酸水平明显升高（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，各治疗组治疗4 w尿酸水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。与正常对照组比较，模型组CNT2 mRNA转录水平显著升高（P<0.01），UAT mRNA转录水平显著降低（P<0.01）；与模型组比较，各治疗组CNT2 mRNA转录水平明显降低（P<0.01），UAT mRNA转录水平明显升高（P<0.01）。
· 作者单位 1.厦门大学医学院（福建 厦门 361102）；2.中国中医科学院广安门医院（北京 100053）
高尿酸血症（hypemricemia，HUA）是嘌呤代谢紊乱引起的代谢异常综合征。日常饮食下，非同日2次血尿酸水平≥420 μmol/L即可诊断为HU
尿酸需要依赖尿酸转运体通过细胞膜，故尿酸转运体表达异常可导致血尿酸（serum Uric Acid，sUA）升高，继而引发HUA。在机体sUA水平的稳态调节中，尿酸转运体发挥重要作用。目前，西医学临床常用的降尿酸药有抑制尿酸生成药和促进尿酸排泄药两大类，由于药物品种相对较少，且可伴肝肾毒性、严重过敏反应等不良反应，临床治疗有局限性。土藤草汤是孟凤仙教授的经验
雄性SPF级SD大鼠30只，体质量（200±10） g，购自厦门大学实验动物中心，实验动物生产许可证号：SCXK（闽）2018-0003。所有大鼠饲养于厦门大学实验动物中心屏障环境，环境温度22～24 ℃，湿度50%～60%。
土藤草汤药物组成：虎杖100 g，土茯苓100 g，忍冬藤150 g，大血藤50 g，金钱草50 g，黄柏50 g，没药50 g，白芷50 g。一煎加水4000 mL浸泡10 min，武火煮沸后文火煮40 min过滤取药液；二煎加水3000 mL，武火煮沸后文火再煮30 min过滤取药液；将两次药液混合后浓缩蒸馏成250 mL。
别嘌呤醇片（0.01 g/粒，批号：20200802，国药准字：H20033683），购自世贸天阶制药江苏有限责任公司。
腺嘌呤Adenine，高纯98%（LOT：S09S10D97125，上海源叶生物科技有限公司）；酵母浸膏（批号：20200419，上海博微生物科技有限公司）；鸡蛋黄粉（河南万邦实业有限公司）；蔗糖（河南万邦实业有限公司）；普通饲料购自厦门大学实验动物中心；水合氯醛（批号：20150303，国药集团化学试剂有限公司）；尿酸试剂盒（批号：YX-W-A509，上海优选生物科技有限公司）；30%丙烯酰胺（批号：BL513B，Biosharp）；十二烷基硫酸（批号：S8010，Solarbio）；乙醇（批号：10009218，国药集团）；RNA提取试剂盒（批号：RN03，艾德莱生物技术有限公司）；逆转录试剂盒（批号：FSQ-101，TOYOBO）；Agarose（批号：1110GR100，Biofrox）；50×TAE（批号：T1060-500，Solarbio）；4S Green Plus Nucleic Acid ［批号：EA26BA0029，生物工程（上海）股份有限公司］；DNA ploymerase（批号：AP231，TransStart）；Trans2K Maker（批号：BM101，TransStart）。
健康雄性SD大鼠30只，适应性喂养1 w。随机取6只大鼠作为正常对照组，正常喂养。剩余24只大鼠根据参考文
临床60 kg成人高尿酸血症患者每日常规服用250 mg别嘌呤醇，根据参考文
正常对照组大鼠的体质量稳步增加；与正常对照组比较，模型组及各治疗组体质量较轻，生长速度较缓。见
| 组别 | 治疗前 | 治疗3 w后 | 治疗4 w后 |
|---|---|---|---|
| 正常对照组 | 245.17±7.00 | 336.50±11.59 | 399.50±25.63 |
| 模型组 |
220.67±20.9 |
290.83±16.4 | 372.83±32.31 |
| 阳性药组 |
249.83±7.6 | 271.67±20.05 | 355.00±14.63 |
| 土藤草汤高剂量组 |
242.33±6.3 | 297.00±25.93 | 329.67±50.23 |
| 土藤草汤低剂量组 | 246.33±11.02 | 277.33±31.21 | 343.00±35.17 |
注： 与正常对照组比较
治疗前，与正常对照组比较，模型组及各治疗组sUA水平明显升高（P<0.05），说明HUA大鼠造模成功；与模型组比较，各治疗组sUA水平差异无统计学意义（P>0.05）。
与正常对照组比较，治疗3 w、4 w后模型组sUA水平明显升高（P<0.05或P<0.01）；与模型组比较，各治疗组治疗4 w后sUA水平明显降低（P<0.05或P<0.01），且土藤草汤高剂量组的sUA水平明显低于土藤草汤低剂量组（P<0.05）。见
| 组别 | 治疗前 | 治疗3 w后 | 治疗4 w后 |
|---|---|---|---|
| 正常对照组 | 70.15±4.23 | 75.56±13.65 | 73.25±8.46 |
| 模型组 |
105.23±24.0 |
123.56±14.4 |
102.22±13.4 |
| 阳性药组 |
106.29±30.4 | 113.85±14.71 |
72.86±8.6 |
| 土藤草汤高剂量组 |
103.42±10.2 | 112.29±25.38 |
75.41±10.0 |
| 土藤草汤低剂量组 |
105.25±19.4 | 115.65±12.82 |
85.15±12.0 |
注： 与正常对照组比较
与正常对照组比较，模型组CNT2 mRNA转录水平显著升高（P<0.01），UAT mRNA转录水平显著降低（P<0.01）。与模型组比较，各治疗组CNT2 mRNA转录水平明显降低（P<0.01），UAT mRNA转录水平明显升高（P<0.01），且土藤草汤高剂量组对CNT2 mRNA、UAT mRNA转录水平的改善明显优于土藤草汤低剂量组（P<0.05）。见
| 组别 | CNT2 | UAT |
|---|---|---|
| 正常对照组 | 1.00±0.20 | 1.00±0.06 |
| 模型组 |
2.60±0.1 |
0.28±0.1 |
| 阳性药组 |
1.38±0.4 |
0.76±0.1 |
| 土藤草汤高剂量组 |
1.49±0.2 |
0.62±0.1 |
| 土藤草汤低剂量组 |
2.05±0.2 |
0.43±0.0 |
注： 与正常对照组比较
HUA是嘌呤代谢异常引起血清尿酸水平过高的一类疾病。高血尿酸和尿酸盐沉积等因素诱发痛风急性炎症反应。尿酸是一种弱有机酸，作为人体嘌呤代谢的天然产物，约2/3源于内源性因素（如核酸分解代谢等），剩余1/3由所摄入的嘌呤含量丰富的食物生
本实验选用雄性SD大鼠，这是因为啮齿类动物具有与人类相似的生理、生化特性，选择雄性大鼠可避免雌性激素分泌波动对实验造成干
肠道的尿酸盐转运蛋白与不以尿酸为底物的转运蛋白及相关支架蛋白共同参与维持机体尿酸的动态平衡。部分尿酸盐的转运蛋白在肠道表达，负责尿酸在肠道的转运。除此之外，小肠上皮细胞还分布着许多不以尿酸为底物的转运蛋白及相关支架蛋
尿酸盐为极性分子，不能自由通过细胞膜脂质双分子层，其重吸收与分泌依赖离子通道。尿酸转运蛋白UAT是一种特异性分泌型尿酸转运体，主要在肾脏和肠道表达。根据相关研究报道，尿酸盐转运体UAT为电压敏感性离子通道，贯穿于细胞膜的脂质双分子层中，胞浆外侧分布有尿酸盐转运体上的结合位点，且其第1、2跨膜螺旋之间有2个由6个氨基酸组成的肽链连接的β片层，而尿酸盐的结合位点则是由第2、3跨膜α-螺旋胞浆侧形成的发夹样结
中医辨证将现代医学的HUA归类为“湿毒”“尿浊”“浊瘀”，伴发痛风则称“历节”“痹证”，病位在脾、肾、肝、肠等，围绕湿、毒、虚、瘀、热、浊发生病变。赵智
综上所述，本研究以肠道尿酸转运体为切入点，通过观察土藤草汤干预后HUA大鼠肠道UAT、CNT2转录水平变化，探讨土藤草汤对HUA大鼠肠道尿酸转运体的影响。结果表明，土藤草汤可作用于转运体CNT2和UAT两个靶点，在减少肠道重吸收的同时增加尿酸排泄，从而降低血清中尿酸的含量。本实验证实了土藤草汤通过调节肠道尿酸转运体的表达改善尿酸排泄从而降低HUA模型大鼠sUA水平，为临床应用土藤草汤提供理论依据。
本实验有关肠道尿酸转运体UAT、CNT2的蛋白表达水平尚未探究，此外更多相关的肠道尿酸转运体以及尿酸转运机制和肠道的降尿酸机制仍需深入探讨。未来的研究需要以肠道为靶点，进一步寻找肠道尿酸转运蛋白的确切作用及机制，为HUA和痛风患者提供更为广泛有效的治疗方案。
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