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中药调控水通道蛋白表达的研究进  PDF

  • 卓祖顺
  • 谢斌
  • 施旻
  • 王飞
  • 聂建华
江西中医药大学中医学院(江西 南昌 330004)

最近更新:2023-09-06

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目录contents

摘要

津液代谢失调会导致疾病的产生,中药治疗津液代谢失常类疾病效果显著,其作用机制为近年来的研究热点。水通道蛋白是细胞水液进出的重要通道,参与机体水液代谢。研究表明中药调控水通道蛋白表达进而调节机体水液代谢是中医治疗津液代谢失常类疾病的机制之一,文中综述了单味中药及中药复方调控水通道蛋白的作用机制。

津液是人体内正常水液的总称,具有滋润濡养之效,可维持脏腑正常生理功能,并受脏腑调控。中医认为脏腑功能与津液代谢相互影响,而针对性的中药可调节脏腑生理功能,平衡津液代谢。

水通道蛋白(Aquaporins,AQPs),又名水孔蛋白,广泛分布于人体各个组织与器官,是维持细胞水液代谢的重要通道。目前发现AQPs共有13种亚型,参与机体水液代谢平衡,维持正常生命活动。基于中药调控AQPs的相关研究,可以从分子水平诠释中医平衡津液代谢的作用机制,为中药治疗津液代谢失调类疾病提供客观依据。近年来,单味中药及中药复方调控肺、胃、肠与肾AQPs的表达为研究热点,本文对此展开综述,为今后的研究与临床精准用药提供参考。

1 中医对津液代谢的认识

《黄帝内经》最早阐述津液代谢需要多个脏腑共同参与,如《素问·经脉别论》曰:“饮入于胃,游溢精气,上输于脾。脾气散精,上归于肺,通调水道,下输膀胱。水精四布,五经并行,合于四时五脏阴阳,揆度以为常也。”《素问·逆调论》进一步指出:“水者,循津液而流也,肾者水脏,主津液,主卧与喘也。”同时《脾胃论》指出:“大肠主津,小肠主液,大肠、小肠受胃之荣气,乃能行津液于上焦,灌溉皮肤,充实腠理。”中医认为津液代谢始于水谷入胃,经胃腐熟,传至小肠,小肠泌别清浊,浊者为水谷之糟粕,下纳大肠,肠摄水液,余为粪便,排出于外;清者为水谷之精微,上输于脾,脾主升清,上归于肺,经肺气宣发肃降,将清中之清布散于四肢百骸,而清中之浊,外达肌表,化为汗液,下输膀胱,经肾气化,化为尿液,排出于外。由此可见,津液代谢与肺、胃、肠、肾最为相关。

2 水通道蛋白结构、功能与分布

从结构与功能上来看,AQPs是一种跨膜蛋白,由270个氨基酸,6个跨膜段组成,位于第二、三跨膜螺旋之间的B环与第五、六跨膜螺旋之间的E环中存在2个半孔螺旋,每个半孔螺旋从一个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(Asn-Pro-Ala,NPA)开始,与周围几种氨基酸一起,形成通道孔的关键结构,可调控水液在细胞膜上的双向运输,被称为“细胞的水泵”。因此,AQPs是细胞水液运输的途径之一。

从分布上看,水孔蛋白在肺部仅有AQP1、AQP3、AQP4、AQP5表[

1]。在胃肠道中,AQPs的分布具有复杂性,其中AQP1在胃肠内皮细胞中大量分布,AQP3和AQP4在胃肠道上皮细胞的基底膜外侧中高度表达,AQP7、AQP8、AQP10和AQP11在小肠与大肠的上皮细胞顶端大量表[2]。在肾脏中,AQP1、AQP7分布在近端小管,而AQP2、AQP3和AQP4则分布在集合管系统,AQP6、AQP8和AQP11定位于细胞[3]。综上所述,AQPs在人体肺、胃、肠与肾中广泛分布,并参与机体内水液代谢。

3 中药对肺AQPs表达的影响

在中医理论中,肺为水之上源,津液通过肺气宣降,上输头面,外达肌表,下注脏腑,参与全身津液的布散,而内、外因皆可扰肺,导致肺内与全身津液布散异常。内因以气虚、阴虚为主,外因以风邪、寒邪、热邪、燥邪为主,影响肺气宣降,阻碍津液布散。中医常以益气、滋阴、祛风、散寒、清热、润燥等方药治之,以恢复肺脏生理功能,调节津液代谢。

3.1 单味中药调控肺部AQPs表达

竹沥具有清热化痰之效,研[

4]表明,竹沥能够增强肺组织中AQP1、AQP5表达,降低肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(NInterleuki-6,IL-6)的浓度,减轻慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Lung Disease,COPD)模型大鼠的症状。麦冬为养阴润肺的常用药物,研[5]发现麦冬能够上调肺部AQP1、AQP5表达,减轻肺炎支原体小鼠肺组织病理损伤。虎杖具有利湿、化痰之效,研[6]表明其有效成分虎杖苷可以提高大鼠肺部AQP1、AQP5表达,降低肺部TNF-α浓度水平,纠正水液代谢失衡,减缓肺部水肿。可见,竹沥、麦冬、虎杖等单味中药能够调控肺部AQP1、AQP5的表达水平,调节津液代谢,改善肺部功能。

3.2 中药复方调控肺部AQPs表达

3.2.1 减轻肺水肿

AQP1、AQP5是肺部水液代谢的重要途径之一,上调肺部AQP1、AQP5表达水平,可以提高肺部水液运转能力,减轻肺水肿。肺与大肠相表里,大承气汤具有通腑泄热之效,研[

7]证实大承气汤可以增加肺部AQP1、AQP5的表达,减轻急性肺损伤所致肺水肿状态。激活环磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate,cAMP),可使蛋白激酶A(protein Kinase A,PKA)磷酸化,上调肺部AQP1、AQP5表达,促进肺内水液代谢。小青龙汤具有散寒化饮之效,研[8]证实小青龙汤可以激活cAMP/PKA信号通路,上调AQP1、5和上皮细胞钠通道α亚单位的表达,减轻肺水肿,改善肺功能。王文霸[9]研究发现,麻黄汤合大承气汤可上调AQP1、AQP5表达,减轻肺水肿,其机制与激活cAMP/PKA信号通路相关。可见,大承气汤、小青龙汤、麻黄汤合大承气汤等中药复方可上调肺部AQP1、AQP5表达,促进肺部水液转运,其机制与激活cAMP/PKA信号通路有关。

3.2.2 抑制气道黏液高分泌

黏蛋白5AC(Mucin 5 Subtype AC,MUC5AC)是分泌型黏蛋白之一,上调黏膜下腺AQP5表达会引起黏蛋白浓度降低,从而减轻气道黏液高分泌状态。付海晶[

10]研究发现,苏子降气汤可通过上调肺部AQP5表达水平,抑制肺组织MUC5AC表达,减轻气道黏液高分泌状态,改善COPD症状。小青龙[11]可以增强肺组织AQP5,抑制MUC5AC表达,减少气道黏液分泌。养阴清肺[12]可以通过抑制MUC5AC表达,促进AQP5表达水平,改善肺内水液失调,发挥“润燥”之效。以上提示,苏子降气汤、小青龙汤、养阴清肺汤等中药复方能够上调肺部AQP5表达,抑制MUC5AC表达,有效减轻气道黏液高分泌状态。

3.2.3 改善肺损伤

AQP5在Ⅰ型肺泡中高度表达,能清除肺泡内多余水液,而肺表面活性物质(pulmonary surfactant,PS)由Ⅱ型肺泡分泌,增加PS表达能促进Ⅱ型肺泡增殖与分化,加速肺损伤的修[

13]。桑杏汤具有生津润肺之效,研[14]发现桑杏汤可以上调温燥模型小鼠肺组织AQP5表达,促进PS产生,增加气道液分泌,发挥生津润燥之效。吴振起[15]研究发现,清燥救肺汤可以增强AQP5、表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)的表达,提高肺部干湿比,减轻肺部炎症。雷宁[16]研究发现,麦门冬汤能够上调肺部AQP5、表面活性蛋白C(surfactant protein C,SP-C)表达,促进肺纤维化模型大鼠骨髓间充质干细胞动员及分化,改善肺纤维化。因此,中药复方上调肺部AQP5与PS相关蛋白的表达可降低肺部炎症水平,改善肺部纤维化状态。

4 中药对胃部AQPs表达的影响

胃主受纳腐熟,为津液生化之源。虚实之邪均可侵扰胃腑,实邪以寒邪、湿邪、热邪为主,虚邪以气虚、阴虚、阳虚为主。邪犯胃腑,胃失其用,水谷难消,精微不化,导致津液生成不足。同时,饮食积滞,痰浊内生,阻碍津液输布,影响津液代谢。故中医临床以散寒、祛湿、清热、益气、滋阴、温阳等方药治之,效果显著。

4.1 单味中药调控胃AQPs表达

李慧君[

17]研究表明,茯苓可抑制胃部AQP3、AQP4信号通路,降低胃内水液重吸收,发挥利水祛湿功效,治疗湿阻中焦疾病。沈明[18]研究发现,鸡内金能提高胃AQP4、胃泌素(Gastrin,Gas)和胃动素(Motilin,Mot)表达,改善功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠胃功能。胡小勤[19]研究表明,黄芩和苍术对脾胃湿热证大鼠胃部炎症具有改善作用,其作用机制与抑制胃部AQP4表达,从而发挥“燥湿”之效有关。以上提示,茯苓、鸡内金、黄芩和苍术等燥湿、消食类中药具有调控胃部AQPs表达,改善胃部水液代谢与胃功能的作用。

4.2 中药复方调控胃AQPs表达

4.2.1 上调AQP3、AQP4表达

AQP3、AQP4在胃部高度表达,能调节胃部水液代谢。曹峰[

20]研究发现,茯苓甘草汤通过血管活性肠肽(Vasoactive Intestinal Peptide,VIP)信号通路,增强FD大鼠胃部AQP3表达,改善胃内水液潴留症状。武云[21]研究发现,舒肝解郁胶囊通过VIP/cAMP信号通路,上调胃部AQP3表达水平,调节水液代谢。屈涛[22]研究发现,资生汤可以上调慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠Gas和胃窦部AQP3、AQP4表达,显著改善CAG大鼠胃分泌功能。以上实验表明,茯苓甘草汤、舒肝解郁胶囊、资生汤等健脾、祛湿类复方通过调节VIP、Gas的表达水平,上调胃部AQP3、AQP4表达,影响胃部水液代谢,并对胃液、胃黏膜产生影响,恢复胃部生理功能。

4.2.2 调控AQP1、AQP3、AQP4表达

[

23]表明,AQP4能调节胃蛋白酶原的表达水平,AQP3、AQP4对胃酸的分泌产生影响,AQP1、AQP4在维持胃黏膜完整性方面起重要作[24],而胃部炎症常伴随胃酸分泌过多与胃黏膜损伤。黄家望[25]研究发现,附子理中汤可以上调AQP1,下调AQP3、AQP4表达促进水液代谢,缓解大鼠胃组织溃疡和水肿程度。马慧[26]研究发现,养阴活胃合剂通过升高血清胃蛋白酶原Ⅰ水平,上调AQP3、AQP4表达水平,降低胃蛋白酶原Ⅱ、AQP1水平,改善CAG大鼠的胃酸分泌。可见,附子理中汤、养阴活胃合剂等中药复方能调控胃部AQPs及胃蛋白酶原表达水平,发挥抑酸、修复胃黏膜等功能。

5 中药对肠道AQPs表达的影响

大肠主津,小肠主液,肠摄津液,使肠道润燥有度,大便排泄如常。燥热内盛,肠失濡润,可发为便秘;水湿内聚,清浊不分,则发为泄泻。故以清热润燥之药滋津液,利水渗湿之品化湿邪。

5.1 单味中药调控肠道AQPs表达

肠道AQP3、AQP4在上皮细胞的基底膜外侧中高度表达,调节肠腔中水液含量。彭小圆[

27]研究发现,车前子能够上调结肠AQP3表达,增强结肠对肠腔内水液吸收,从而发挥渗湿止泻功效。包佳鹭[28]研究发现,大黄能够降低结肠AQP3、AQP4表达,抑制结肠对肠腔内水液吸收,从而发挥泻下功效。王师英[29]研究表明,黄连能够减轻溃疡型结肠炎模型大鼠肠道黏膜炎症与腹泻,其作用机制与上调肠黏膜上皮细胞AQP3、AQP4表达有关。

5.2 中药复方调控肠道AQPs表达

5.2.1 促进排便

激活cAMP/PKA信号通路可以调控肠道AQPs磷酸化表达,调节肠腔内水液含量。现代研[

30]表明,便秘的发生与结肠AQP3密切相关,渗透性泻药能增强结肠AQP3的表达水平,而刺激性泻药可抑制结肠AQP3表达,二者均可增加粪便含水量,促进排便。王璐[31]研究发现,助阳通便膏激活VIP/cAMP/PKA/AQP3信号通路,发挥通便作用。门唤[32]研究发现,枳术汤可激活cAMP/PKA/AQP3信号通路,促进脾虚小鼠排便。周永学[33]研究表明,硝菔通结方可以通过激活cAMP/PKA/AQP3 信号通路表达,增加大鼠粪便湿重与数量,改善大鼠功能性便秘。另一方面,相关研究表明抑制cAMP/PKA/AQPs通路可以抑制肠道AQPs表达,促进排便。杨颖[34]研究发现,济川煎可抑制cAMP/PKA信号通路,下调慢传输型便秘大鼠结肠AQP3、AQP4表达,减少肠道对水液重吸收,增加粪便湿度。由此可见,助阳通便膏、枳术汤、硝菔通结方、济川煎等中药复方可调控cAMP/PKA信号通路,影响结肠AQPs表达,调节肠道水液代谢,促进排便,治疗便秘。

5.2.2 减轻肠道炎症

在炎性肠病的早期阶段,肠道AQPs表达异[

35],上调肠道AQPs表达水平可以减轻肠道组织水肿与炎症水平。马旭冉[36]研究发现,黄芩汤可以升高结肠AQP4表达,改善溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)模型大鼠结肠组织病变损伤,减轻炎症浸润。李艺垚[37]研究发现,久泻宁可以激活cAMP/PKA信号通路,增强UC大鼠结肠AQP4、AQP8表达,减轻结肠组织间质水肿,并抑制血清中TNF-α表达水平,降低结肠炎症水平。董焕成[38]研究发现,归芪白术方联合奥沙利铂可以上调结肠组织AQP3、AQP4表达,减轻胃癌荷瘤小鼠肠道炎症浸润,其作用机制与激活上调cAMP/PKA信号通路有关。可见,黄芩汤、久泻宁、归芪白术方等中药复方能够激活cAMP/PKA信号通路,上调肠道AQPs表达,减少肠组织与肠腔内水液含量,同时降低组织炎症水平,治疗肠炎性疾病。

6 中药对肾脏AQPs表达的影响

肾气推动津液输布与排泄,肾气蒸腾气化将脏腑代谢后的浊液化为尿液排出体外。肾气虚、肾阴虚、肾阳虚均对肾的生理功能产生影响,导致小便排泄异常,影响津液代谢。故中医常以益气、滋阴、温阳类中药治之,补其不足,恢复肾脏生理功能,调节津液代谢。

6.1 单味中药调控肾脏AQPs表达

商陆具有通利二便之效,其有效成分商陆总皂[

39]能够显著降低肾脏AQP1、AQP2、AQP3、AQP4的表达,通过利尿减少癌性腹水小鼠腹水量。肖[40]研究发现,龟甲胶通过上调肾脏AQP1、AQP2表达,改善肾阴虚大鼠水液代谢紊乱。李慧君[41]研究发现,茯苓可降低肾阳虚大鼠AQP1、AQP2表达,增加大鼠尿量,改善水肿状态。以上提示,商陆、龟甲胶、茯苓等单味中药能够调控肾脏病理状态下AQPs表达水平,调节水液代谢。

6.2 中药复方调控肾脏AQPs表达

6.2.1 基于AVP上调AQP2

精氨酸加压素(Arginine vasopressin ,AVP)为肽类激素,具有收缩血管作用,能够影响肾脏水液吸收。肾脏AQP2参与原尿重吸收过程,并受AVP调节,肾脏AQP2失调与肾脏水液代谢紊乱相关。何嘉娜[

42]研究发现,肾气丸通过AVP/精氨酸加压素V2受体(Arginine vasopressin V2 receptor,V2R)/cAMP/PKA信号通路,上调AQP2表达水平,改善水液代谢紊乱。操红缨[43]研究表明,缩泉丸可以提高肾阳虚多尿大鼠AQP2与V2R mRNA表达,发挥“缩尿”功效。Xiong Rui[39]研究发现二神丸通过增强V2R/AQP2表达水平,改变肾脏重吸收率,减少大鼠尿量,缓解肾脏病理损伤。以上表明,肾气丸、缩泉丸、二神丸等中药复方可上调肾脏AQP2表达,改善肾脏水液代谢紊乱。

6.2.2 基于AVP下调AQP2

AQP2是调节水通透性的关键蛋白,与肾病水肿密切相关,且AVP和AQP2均参与原发性高血压(essential hypertension,EH)的发生发[

45]。在EH大鼠模型中,肾脏AQP1、AQP2、AQP3表达上调,并与AVP/cAMP活性增强有[46]。戴淑娟[47]研究发现,当归芍药散可抑制AVP/V2R信号通路,下调肾脏AQP2表达,降低肾脏对水的重吸收,促进尿液排泄,减轻水肿。吴君[48]研究发现,五苓散能降低高血压大鼠的血压,其作用机制与降低肾脏组织中的V2R/AQP2蛋白的表达相关。周小杰[49]研究发现,真武汤可通过调节水液代谢平衡,发挥对高血压肾脏保护作用,其作用机制与抑制肾脏AVP/AQP2表达水平有关。可见,当归芍药散、五苓散、真武汤等中药复方可通过抑制AVP/AQP2信号通路表达水平,发挥利水消肿、降血压及保护肾脏的功能。

7 总结与展望

疾病的发生与津液代谢异常息息相关,中医治疗津液代谢失调类疾病历史悠久,疗效确切。本文通过对AQPs的功能、在肺、胃、肠与肾相关疾病中的作用及中药干预进行阐述,发现AQPs受到cAMP/PKA、AVP/cAMP等信号通路调控,而中药能够调控AQPs 的表达,影响MUC5AC、PS、TNF-α等表达水平,发挥利水、补液、抗炎、通便、止泻、降压和保护相关脏器等功能,表明中药可以通过调控AQPs表达,实现对津液代谢失常类疾病的防治作用。因此,围绕AQPs在津液代谢失常类疾病中的作用机制与中医药调控进行研究,对相关疾病的防治具有重要意义。

目前相关研究发现,中药及中药复方可以调控水通道蛋白,纠正津液代谢失衡,改善津液代谢环境,减缓津液代谢失常类疾病进展,因此中药及复方对相关疾病中AQPs信号通路的调控是中医药防治作用的方向之一,同时为中医药的津液代谢理论提供了科学的实验数据。但目前的相关研究仍聚焦于基础研究,临床研究较少,在一定程度上缺乏临床指导意义。

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