摘要
通过建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAo）模型，设立假手术组、MCAo组、再灌注组、电针+再灌注组，每组20只，应用Zausinger法进行神经功能缺损评分、TTC染色法检测脑梗死面积、TUNEL染色法检测脑皮层缺血半暗带区域神经元凋亡水平。观察大脑中动脉缺血90 min后，再灌注前行电针水沟穴和百会穴，与单纯再灌注处理对改善大脑中动脉缺血脑组织损伤的比较。
造模后24 h，再灌注组的神经功能评分、相对脑梗死面积、脑皮层缺血半暗带区域神经元凋亡水平较MCAo组均有显著改善（P<0.01），而电针+再灌注组在改善神经功能评分、相对脑梗死面积和缺血半暗带区神经元凋亡水平方面较单纯再灌注处理更优（P<0.05）。
Lancet发表的最新中国疾病负担报
清洁级雄性SD大鼠，体质量220~250 g，购于厦门大学实验动物中心，许可证号：SCXK（闽）2008-0001。于实验前适应环境1 w，控制室温（22±1）℃，湿度（55±5）%，光照时间7:00~19:00，自由摄食和饮水，在厦门大学动物实验中心分组饲养。按照随机数字表法将大鼠随机分为4组，分别是假手术组、MCAo组、再灌注组和电针+再灌注组，每组20只。在实验过程中死亡及造模不合格的大鼠由备用大鼠补齐。
2，3，5-三苯基氯化四氮唑（TTC）（美国Sigma）；TUNEL试剂盒（美国Roche）；戊巴比妥钠（德国Merck）；韩氏穴位神经刺激仪（南京济生医疗科技有限公司）；荧光显微镜（德国Leica）；切片机（德国Leica）。
参照Zea Long
大鼠水沟穴和百会穴定位参照《实验针灸学
大鼠造模后24 h，每组随机取10只，参照Zausinge
神经行为学评分后，每组随机取10只大鼠采用2％戊巴比妥钠（0.2 mL/100 g）腹腔注射麻醉后断头取脑，将大鼠大脑切成2 mm的冠状切片。将脑切片放入2％TTC溶液，于37 ℃温箱中孵育10 min，再用4％多聚甲醛溶液固定后拍照，使用image pro plus6.0软件测定梗死面积（梗死面积=对侧半球面积-病变半球非梗死面积），然后计算相对脑梗死面积百分比，即梗死面积与对侧半球面积的比值。
经单因素方差分析，各组大鼠神经功能评分有显著差异（P<0.01）。各组经两两比较，MCAo组大鼠神经功能评分显著低于假手术组（P<0.01）；经再灌注干预，再灌注组大鼠神经功能评分显著高于MCAo组（P<0.01）；而经电针干预后再进行再灌注处理，电针+再灌注组大鼠的神经功能评分较再灌注组又有显著提高（P<0.05）。见
图1 各组大鼠干预后神经功能评分比较
注： 与假手术组比较
经单因素方差分析，各组大鼠相对脑梗死面积百分比有显著差异（P<0.01）。各组经两两比较，MCAo组大鼠相对脑梗死面积百分比显著高于假手术组（P<0.01）；经再灌注干预，再灌注组大鼠相对脑梗死面积百分比较MCAo组显著降低（P<0.01）；而经电针干预后再进行再灌注处理，电针+再灌注组大鼠的相对脑梗死面积百分比较再灌注组进一步显著降低（P<0.05）。见
图2 各组大鼠干预后相对脑梗死面积百分比比较
注： 与假手术组比较
经单因素方差分析，各组大鼠大脑皮层缺血半暗带细胞凋亡水平有显著差异（P<0.01）。各组经两两比较，MCAo组大鼠大脑皮层缺血半暗带细胞凋亡水平显著高于假手术组（P<0.01）；经再灌注干预，再灌注组显著低于MCAo组（P<0.01）；而经电针干预后再进行再灌注处理，电针+再灌注组大鼠大脑皮层缺血半暗带细胞凋亡水平较再灌注组又有显著降低（P<0.01），见
图3 各组大鼠干预后大脑皮层缺血半暗带TUNEL凋亡阳性细胞率比较
注： ◇与假手术组比较，P＜0.01；☆与MCAo组比较，P＜0.01；△与再灌注组比较，P＜0.01
石学敏院士于1972年开创“醒脑开窍”针刺法治疗中风病，其基于对古医籍及现代医学理论的深入研究，创先提出对中医理论中“神”的把握及对中风病病机“窍闭神匿，神不导气”的认识，明确其病位在脑，确立了以醒脑开窍、滋补肝肾为主，疏通经络为辅的针刺治疗方法，经过四十年的临床验证，取得了显著的疗
脑缺血后的溶栓治疗，不仅要面临脑出血的风险，还要考虑其它副作用，其中一个很重要的方面就是脑缺血再灌注损伤（CIRI）。脑缺血再灌注损伤的主要病理变化为细胞凋亡，凋亡是机体为了维护内外环境的稳定,通过多种途径使细胞主动死亡的过程，属于一种生理性的细胞死亡，是可逆的。因此，本研究将电针干预置于再灌注前，明确大脑中动脉缺血后，从神经行为学、组织形态学和细胞病理学角度，再灌注前电针水沟穴和百会穴可以进一步改善大脑中动脉缺血性损伤，同时也在一定程度上逆转了缺血半暗带再灌注引起的神经元凋亡，为急性脑梗死患者溶栓治疗前予电针干预的可行性提供了基础实验依据，以期未来可将这一治疗手段应用于急性脑梗死的抢救治疗中。笔者团队将在后续的研究中探索相关机制，如电针联合再灌注如何通过钙超载、炎症、氧化应激等途径改善缺血性脑梗死的神经元凋亡。
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