摘要
将150只SPF级雄性小鼠随机分成3批，每批分成5组，即模型组、铁包金低剂组（2 g/kg）、铁包金中剂组（4 g/kg）、铁包金高剂组（8 g/kg）、氟西汀组（20 mg/kg），各组给药1 h后分别进行强迫游泳实验（FST）、悬尾实验（TST）及开场实验（OFT）。另取60只SPF级雄性小鼠随机分成6组，即正常对照组、模型对照组、铁包金低剂组（2 g/kg）、铁包金中剂组（4 g/kg）、铁包金高剂组（8 g/kg）、氟西汀组（20 mg/kg），各组持续给予相应药物7 d，最后一次给药后注射LPS，采用糖水偏好实验和FST评价动物抑郁样行为。采用Western Blot方法测小鼠海马组织中成纤维细胞生长因子2（FGF2）、磷酸化及总成纤维细胞生长因子受体1（FGFR1）的含量。
铁包金可以缩短小鼠强迫游泳和悬尾不动时间，对小鼠自发活性行为则没有影响，提示铁包金具有良好的抗抑郁效果。同时，铁包金能够显著增加LPS抑郁小鼠糖水偏好值，减少小鼠游泳不动时间；并可显著增加小鼠大脑海马FGF2表达量，提高FGFR1磷酸化水平。
• 作者单位 1.厦门市中医院（福建 厦门 361009）；2.厦门市医药研究所（福建 厦门 361008）；3.华侨大学（福建 厦门361021）
抑郁症是一种常见的精神性疾病，临床表现主要是情绪低落，患者往往愁眉苦脸，感受情绪能力差，对身边事物没有兴趣，从日常生活中体验不到快乐。世界卫生组织指出目前抑郁症影响全球1.2亿人，已成为全球第二大负担疾病。抑郁症的发病率和复发率较高，治疗药物价格相对昂贵，对患者家庭和社会产生了相当沉重的经济压力。因此，迫切需要价格低廉、疗效好的抗抑郁药物。
铁包金始载于《岭南采药录》，并为《广西中药材标准（1990）》所收录，该标准收录的铁包金是鼠李科勾儿茶属植物细叶勾儿茶Berchemia lineata (L.) DC.的干燥根，主要分布于我国南部的广西、福建、广东、海南等省区。其性味淡、涩、平，具有固肾益气、镇咳消滞、止血止痛等多种功效，用于肿瘤、精神病、心脏病等多种疾病的治疗。关于铁包金的报道主要集中于对其化学成分的研究，而对其药理活性的研究较少。张国利分离到槲皮素、异鼠李素、槲皮素-7- 二甲醚、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、大黄素-鼠李糖苷、异乔木萜醇和β-谷甾
雄性ICR小鼠，SPF级，体重（26±2）g，10周龄，购自上海斯莱克动物中心，实验动物许可证：SCXK（沪）2017-005。小鼠10只/笼，室温（22±2）°C，光暗周期为12 h/12 h（光照时间07:00—19:00），自由获得饲料与饮水，适应环境1 W后开始实验。
盐酸氟西汀（购自常州四药制药有限公司）用磷酸盐缓冲液（pH7.4）溶解；LPS（美国Sigma-Aldrich公司）用磷酸盐缓冲液（pH7.4）溶解。FGF2抗体购买自美国Santa Cruz公司。磷酸化FGFR1抗体、FGFR1抗体购买自美国Abcam公司。
雄性ICR小鼠150只，适应性喂养1 W后，将小鼠随机分为三批。每批分为以下5组（n=10）：模型对照组（生理盐水），铁包金低剂组（2 g/kg），铁包金中剂组（4 g/kg），铁包金高剂组（8 g/kg），阳性对照氟西汀组（20 mg/kg）。按以上分组灌胃给药，给药1 h后，分别进行强迫游泳实验、悬尾实验和开场实验。
在（25±2） ℃下，将小鼠放置在充满40 cm水的透明玻璃容器（高20 cm，直径14 cm）中游泳。除了小鼠试图使头部保持在水面之上所必需的动作以外，小鼠没有试图逃脱的时间被记录为不动时间。实验持续6 min，统计最后4 min内的不动时间。
将小鼠尾巴距尾尖约1 cm处悬挂在长、宽和高分别是25 cm、25 cm和30 cm的装置中，头部朝下悬挂，距离底部约5 cm，总记录时间为 6 min，统计小鼠后4 min内总不动时间，即小鼠完全没有挣扎的状态。
雄性ICR小鼠60只，适应性喂养1 W后，将小鼠随机分为以下6组（n = 10）：正常对照组（生理盐水），模型对照组（生理盐水），铁包金低剂组（2 g/kg），铁包金中剂组（4 g/kg），铁包金高剂组 （8 g/kg），氟西汀组（20 mg/kg）。按以上分组持续灌胃给药7 d，最后1次给药1 h后，除正常对照组外，其余组的小鼠腹腔注射0.83 mg/kg LP
按照之前的文
给药1 h后，低、中、高剂量的铁包金均能显著降低小鼠的游泳不动时间（P<0.05，P<0.05，P<0.01），同时阳性药氟西汀也可显著降低小鼠的游泳不动时间（P<0.05）。见
注： 与模型对照组比较
给药1 h后，低、中、高剂量的铁包金均能显著降低小鼠的悬尾不动时间（P<0.05或P<0.01），同时阳性药氟西汀也可显著降低小鼠的悬尾不动时间（P<0.01）。见
注： 与模型对照组比较
与正常对照组相比，模型对照组小鼠糖水偏好值显著降低（P<0.01）。低、中、高剂量铁包金均可显著增加小鼠糖水偏好值（P<0.05，P<0.01，P<0.01）。同时，氟西汀组也可增加小鼠糖水偏好值（P<0.01）。见
注： 与正常对照组比较
与正常对照组相比，模型对照组小鼠不动时间显著增加（P<0.01）。中、高剂量铁包金可显著降低小鼠不动时间（P<0.05）。同时，氟西汀组也可降低小鼠不动时间（P<0.05）。见
注： 与正常对照组比较
与正常对照组相比，模型对照组小鼠FGF2及磷酸化FGFR1水平显著降低（P<0.05）。中、高剂量铁包金可显著增加LPS小鼠海马FGF2表达水平（P<0.05，P<0.01）。低、中、高剂量铁包金均可显著增加LPS小鼠海马FGFR1磷酸化水平（P<0.05，P<0.05，P<0.01）。同时，氟西汀也可以增加FGF2及磷酸化FGFR1水平（P<0.01，P<0.01）。见
图1 铁包金对LPS小鼠FGF2及FGFR1表达水平的影响(n=5)
中医认为肝主疏泄，性喜条达，情绪郁闷及情绪暴怒等精神刺激，均可使肝失疏泄，气机不畅，以致忧思郁怒，肝气郁结，因此中医主要是从消郁结着手治疗抑郁症。《广西中药材标准》记载民族药铁包金具有镇咳消滞的功效，此功效正适合郁证“气机郁滞”之病机，因此本文首次对铁包金是否具有抗抑郁作用展开了研究。
本实验首先采用强迫游泳实验和悬尾实验来观察铁包金是否具有改善小鼠绝望状态的作用。结果发现，铁包金显著降低了小鼠游泳和悬尾不动时间。与此同时，在开场实验中，铁包金对小鼠自发活动行为没有影响，表明铁包金降低不动时间的作用与神经兴奋性没有关系，即铁包金具有抗抑郁作用。随后，本实验采用LPS诱导的抑郁模型再次评价了铁包金的抗抑郁作用。LPS诱导的炎症抑郁模型广泛地被用于与炎症相关的机制研
FGF是一类生长因子蛋白质家族，包含多个结构相似的多肽。在成年大脑中，FGF2主要在脑室下区和齿状回高度表达，高浓度的FGF2可以促进神经细胞增殖以及促进多能神经干细胞分化，维持成年小鼠的神经发
综上所述，铁包金单次及多次给药均可缓解绝望及快感缺失等抑郁症状，能够逆转LPS诱导的小鼠抑郁样行为。同时本实验探讨了铁包金的抗抑郁作用机制与FGF2/FGFR1信号通路的活化相关，但是实验没有对铁包金有效成分进行分离，未对FGF2/FGFR1下游信号蛋白进行检测，也没有对铁包金如何通过FGF2/FGFR1通路调节小胶质细胞和神经炎症进行深入研究。其后续研究将对抗抑郁新药的开发具有重要的意义。
参考文献
张国利. 铁包金化学成分研究[D].武汉：湖北中医药大学，2011. [百度学术]
沈玉霞. 铁包金化学成分的研究[D]. 武汉：中南民族大学，2011. [百度学术]
曾晓君, 胡 颖, 文晓琼,等. 瑶药铁包金化学成分研究[J]. 中药材, 2012, 35(2):223-225. [百度学术]
YI LT, ZHU JX, DONG SQ, et al. miR-34a induces spine damages via inhibiting synaptotagmin-1 in depression[J]. Neurobiol Stress, 2020, 13(10):243-251. [百度学术]
LIU MY, YIN CY, ZHU LJ, et al. Sucrose preference test for measurement of stress-induced anhedonia in mice[J]. Nat Protoc, 2018, 13(7):1686-1698. [百度学术]
CHEN M, ZHANG QP, ZHU JX, et al. Involvement of FGF-2 modulation in the antidepressant-like effects of liquiritin in mice[J]. Eur J Pharmacol, 2020, 54(881):273-297. [百度学术]
KIN K, YASUHARA T, KAMEDA M, et al. Cell encapsulation enhances antidepressant effect of the mesenchymal stem cells and counteracts depressive-like behavior of treatment-resistant depressed rats[J]. Mol Psychiatry, 2020, 25(6):1202-1214. [百度学术]
TURNER CA, WATSON SJ, AKIL H. Fibroblast Growth Factor 2 Sits at the Interface of Stress and Anxiety[J]. Biol Psychiatry, 2016, 80(6):419-421. [百度学术]
RAJENDRAN R, GIRALDO-VELASQUEZ M, STADELMANN C, et al. Oligodendroglial fibroblast growth factor receptor 1 gene targeting protects mice from experimental autoimmune encephalomyelitis through ERK/AKT phosphorylation[J]. Brain Pathol, 2018, 28(2):212-224. [百度学术]
TANG MM, LIN WJ, ZHANG JT, et al. Exogenous FGF2 reverses depressive-like behaviors and restores the suppressed FGF2-ERK1/2 signaling and the impaired hippocampal neurogenesis induced by neuroinflammation[J]. Brain Behav Immun, 2017, 66(11):322-331. [百度学术]
