益气除痰方下调vimentin表达与逆转 EMT相关性研究
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1.广州中医药大学第一临床学院肿瘤科(510405);2.重庆医科大学中医药学院(401331)

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国家自然科学基金资助项目(No.30772862 ) ▲


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    摘要:

    目的:观察益气除痰方肺癌肿瘤生长、肺转移的影响,并通过差异蛋白组学技术筛选出差异表达蛋白vimentin,并结合相关技术分析其可能的意义。方法:C57BL小鼠40只,接种Lewis肺癌细胞,造模第2天,随机分为对照组(生理盐水)和低、中、高剂量观察组予益气除痰方1.0g·kg-1·d-1,3.0g·kg-1·d-1,9.0g·kg-1·d-1,每组10只,灌胃21d后,检测肿瘤体积、重量、肺转移灶,分别提取最佳剂量治疗组和模型组肿瘤组织的总蛋白,应用双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)系统获得蛋白点表达差异信息,运用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-TOF)鉴定出差异蛋白质。并以荧光定量PCR和Western blot法对差异蛋白进行表达差异鉴定。培养A549细胞,20%益气除痰方含药血清干预,划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变,RT-PCR检测其对A549肺癌细胞MMP-1、MMP2、MMP9、MMP14mRNA基因表达的影响。结果:益气除痰方3.0g·kg-1·d-1治疗组肿瘤体积、瘤重、肺转移灶数均明显小于LEWIS模型组(P<0.01),肿瘤抑制率为57.21%。蛋白质组学研究鉴定受益气除痰方调控影响的蛋白37个,其中vimentin下调尤其明显。20%益气除痰方含药血清可抑制A549细胞的侵袭和转移能力,并能降低MMP2、MMP14mRNA基因的表达,与空白组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:益气除痰方明显下调vimentin表达,抑制A549细胞的运动能力,减少基质金属蛋白酶MMP2、MMP14的分泌,这可能与益气除痰方逆转肺癌细胞上皮-间质转化有关,值得进一步研究。

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引用本文

周京旭,林丽珠,王淑美.益气除痰方下调vimentin表达与逆转 EMT相关性研究[J].,2014,(5):60-63

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  • 在线发布日期: 2016-10-18
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