目的:建立生物基质中乙酰胆碱酯酶抑制剂(AchEI)分离、筛选和鉴定的色谱联用技术,筛选大鼠血浆中的葡萄内酯活性代谢产物。方法:基于乙酰胆碱酯酶的经典分析方法,构建AchEI的流动生化反应与检测系统。葡萄内酯口服给药后,制备得到的大鼠血浆样品经色谱分离后,同时进行质谱、紫外和生化检测,实现葡萄内酯活性代谢产物的分离、筛选和鉴定。结果:筛选得到几个活性代谢产物,发现1个具有较强生物活性的代谢产物。结论:所提出的色谱联用技术可以应用于生物基质中AchEI的在线筛选和鉴定。